數字PCR定量檢測HBVcccDNA

背景與目的：隱匿性乙型肝炎病毒感染(OBI)的準確診斷需要HBsAg陰性者肝活檢組織中HBVDNA的證實。然而，在臨床實踐中，潛伏的OBI是通過發現抗Hb核心抗原的抗體(抗HBc)而推斷出來的。我們調查了抗HBc陽性受試者中OBI的真實患病率和肝內HBV的分子特征。

方法：對100例標準血清學抗-HBc陽性的移植供者(平均年齡68.2歲；男64例，女36例)，用巢式PCR檢測總HBVDNA，用數字PCR檢測HBVcccDNA(線性：R²=0.9998；定量和檢測下限分別為2.4和0.8拷貝/10⁵細胞)。

結果：52%(52/100)的受試者存在真實的OBI狀態，52%(27/52)的OBI陽性者存在cccDNA，中位數為13拷貝/10⁵細胞(95%可信區間5-25)。采用IgG型抗HBc特異性檢測，HBVcccDNA陽性獻血者的中位抗體水平顯著高于陰性獻血者

(5.7 [3.6-9.7] vs. 17.0 [7.0-39.2] COI, p=0.007)。經多因素分析，抗-HBc IgG值>4.4cccDNA與肝內HBVcccDNA的發現相關(OR=8.516，p=0.009)，低于該值則排除其存在，陰性預測值為94.6%。

結論：采用一種新的基于ddPCR的內部檢測方法，在大約一半的OBI病例中，肝內HBV cccDNA可被定量檢測到。抗HBc IgG滴度可能是預測免疫抑制患者OBI再激活風險的有用指標。